PCR儀校準時,通過對室內質控圖的分析,我們可以及時發現系統誤差的出現。經過分析排除了試劑和人員誤差后,應懷疑是否儀器出現了檢測偏差需要校準。此時進行儀器狀態效驗實驗確定是否需要進行儀器校準。
PCR儀隨著頻繁使用和使用時間增加,其溫控傳感器精度下降和導熱膠老化等問題較為嚴重,從而整體降低了儀器的控溫精度,導致目標DNA的擴增受到影響,這時候就需要PCR儀校準了。
對于普通PCR儀,以及熒光定量PCR儀的溫度部分需要進行溫度的期間核查。控溫系統的期間核查參數包括:溫度偏差、溫度均勻度、平均升溫速率、平均降溫速率、溫度過沖等,實驗室可根據實際情況進行選擇取舍。
PCR實驗數據結果對臨床檢驗、檢驗檢疫、法醫鑒定、疾病控制、體外診斷試劑制造和研發、生物技術產品研發等領域的研究和確證工作非常重要,而對PCR儀有效的量值溯源和準確性驗證,是確保PCR實驗數據可靠和結果準確的基礎。
因此,做好PCR儀的校準、期間核查、維護保養等質量控制工作,確保PCR儀性能持續良好,對分子生物學的研究,特別是保證相關領域確證類數據結果的準確可靠,從而確保國家公共衛生和廣大人民群眾生命安全方面,具有非常重要的意義。
隨著酶學、光學和自動化技術的發展,PCR技術實現了從定性到定量再到數字化定量的發展,從普通PCR到實時熒光定量PCR,再到數字PCR,PCR技術特異性越來越強,自動化程度越來越高。但綜合來看,熒光定量PCR仍然是目前各類檢驗檢測機構使用廣泛的基因檢測和定量技術。